人UroplakinII與小鼠UroplakinII啟動子活性和組織特異

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    人UroplakinII與小鼠UroplakinII啟動子活性和組織特異性對比

    畢業論文

    全部作者: 朱宏建 曾祥福 魏守順 郭應祿
    第1作者單位: 武警總醫院泌尿外科
    論文摘要: 膀胱癌是泌尿外科最常見的惡性腫瘤,基因治療已成為治療惡性腫瘤的重要方法之1。本研究旨在探討人UroplakinII (UPII) 啟動子與小鼠UPII啟動子在人細胞株中的啟動活性和組織特異性強弱。方法: 構建以人或小鼠UPII啟動子為調控基因,以綠色熒光蛋白(GFP)和熒光素激酶(Luc)為報告基因的重組質粒,應用脂質體轉染技術,將重組質粒轉染入膀胱移行細胞癌細胞(BIU-87)和腎癌細胞(GRC-1)、臍靜脈血管內皮細胞(EC)、肺癌細胞(A549)、皮膚成纖維細胞(Hs27),利用共聚焦顯微鏡、流式細胞儀和微板檢測儀觀察細胞表達GFP和Luc的情況。結果: 含人UPII啟動子重組質粒轉染后,BIU-87表達GFP較多,10-15/HP,亮度較強,流式細胞儀測定表達量為10.1%。而GRC-1、EC細胞表達極少,0-5/HP,亮度暗,流式細胞儀測定表達量為0和1.8%。Luc在BIU-87中的表達量是其它組織細胞的2.2倍以上。含小鼠UPII啟動子重組質粒轉染后,BIU-87表達GFP較多,5~10/HP,亮度較強,流式細胞儀測定表達量為4.34%。而EC細胞表達極少,0~2/HP,亮度暗,流式細胞儀測定表達量分別為0%。Luc在BIU-87中的表達量是其他組織細胞的1.8~8.2倍,人UPII啟動子與小鼠UPII啟動子相比,無論是GFP還是Luc差異有顯著性(P<0.01)。結論: 人UPII 啟動子比小鼠UPII啟動子在人細胞株中具有更高的啟動活性和更低的組織特異性。為靶向性基因治療膀胱癌提供了實驗依據。
    關鍵詞: UroplakinII;啟動子;膀胱癌 遠程下載 論文(免費PDF論文全文)
    發表日期: 2006年11月30日
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