外周血單個(gè)核細(xì)胞中肺炎衣原體的分離、培養(yǎng)及傳代

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    外周血單個(gè)核細(xì)胞中肺炎衣原體的分離、培養(yǎng)及傳代

    畢業(yè)論文

    全部作者: 金前 孫書明 王衛(wèi)群 余竹元
    第1作者單位: 復(fù)旦大學(xué)附屬金山醫(yī)院呼吸科
    論文摘要: 目的 分離并培養(yǎng)肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae, Cpn),并進(jìn)行傳代、擴(kuò)增。方法 分離血液標(biāo)本中的外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC),用PEG使Cpn-Ag陽性的PBMC裂解釋放出Cpn,然后與Hep-2細(xì)胞1起離心,繼續(xù)培養(yǎng)Hep-2細(xì)胞。再將Hep-2細(xì)胞凍融破碎后,放入到新的Hep-2細(xì)胞中進(jìn)行離心,以完成Cpn的1次傳代,然后以同樣的方法進(jìn)行2次傳代。分別用微量免疫熒光法(Micro-immunofluorescence, MIF)及PCR法檢測Hep-2細(xì)胞中的Cpn-Ag和Cpn DNA。結(jié)果 MIF法檢測Cpn感染后的Hep-2細(xì)胞,其胞內(nèi)Cpn-Ag陽性;MIF法檢測1次傳代及2次傳代的Hep-2細(xì)胞,其胞內(nèi)Cpn-Ag亦均陽性;PCR法檢測Cpn DNA陽性。結(jié)論 該簡化方法可以實(shí)現(xiàn)PBMC中Cpn的分離,并實(shí)現(xiàn)進(jìn)1步的培養(yǎng)及傳代。
    關(guān)鍵詞: 肺炎衣原體;外周血單個(gè)核細(xì)胞;培養(yǎng);傳代 遠(yuǎn)程下載 論文(免費(fèi)PDF論文全文)
    發(fā)表日期: 2007年04月27日
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