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衛生資格《檢驗技士》預習資料:免疫濁度法
誤差和不確定度
區分誤差和不確定度很重要,因為誤差定義為:被測量的單位結果和真值之差。
由于真值往往不知道,故誤差是一個理想的概念,不可能被確切地知道。
但不確定度是可以一個區間的形式表示,如果是為一個分析過程和所規定樣品類型做評估時,可適用于其所描述的所有測量值。
因此,測量誤差與測量不確定度無論從定義、評定方法、合成方法、表達形式、分量的分類等方面均有區別。
免疫濁度法原理
當可溶性抗原與相應抗體在兩者比例合適時,抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復合物,使反應液出現濁度,如形成的復合物增加,反應液的濁度隨之增加,與一系列的標準品對照,即可計算出受檢物的含量。
按照儀器設計的不同分為透射比濁儀測定法和散射比濁儀測定法。測定方法又可分為速率法和終點法。
凝膠內沉淀試驗
凝膠內沉淀試驗是利用可溶性抗原和相應抗體在凝膠內擴散,形成濃度梯度,在抗原與抗體濃度比例恰當的位置形成肉眼可見的沉淀線或沉淀環。
凝膠支持物的種類:凝膠支持物的種類有瓊脂、瓊脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝膠等。不同分子量的物質在凝膠中擴散速度不同,藉此可用以識別不同待測物分子量的差別。
免疫電泳技術原理
免疫電泳技術實質上是在直流電場作用下的凝膠擴散試驗。它的原理是將凝膠擴散置于直流電場中,在一定的條件下,抗原及抗體離解成為帶正電或負電的電子,在電場中向異相電荷的電極移動,所帶凈電荷量越多、顆粒越小,泳動速度越快,反之則慢。由于電流加速了抗原、抗體的運行速度,縮短了兩者結合的時間,加快了沉淀現象的產生。當有多種帶電荷的物質電泳時,由于靜電荷不同,而區分成不同區帶,使抗原決定簇不同的成分得以區分。
影響因素有:①電場強度;②溶液pH;③離子強度;④電滲等。
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